Конвенционална хроматографија на колони
2.Хроматографски ступац (тип ротације)
3. Цхроматографски ступац (приручник)
*** Ценовник за целокупно горе, питајте нас да бисмо добили
Opis
Tehničke karakteristike
Конвенционална хроматографија на колониКористи разлику у односу дистрибуције различитих супстанци између стационарне фазе и мобилне фазе или различитих капацитета за задржавање фиксних фаза у односу на различите супстанце, да би се постигла раздвајање супстанци. Када смеша тече кроз хроматографску колону са мобилном фазом, она ће комуницирати са стационарним фазом у колони (као што је растварање, адсорпција итд.). Због разлика у физичким и хемијским својствима и структурама сваке компоненте у смеши, величина и снага њихових интеракција са стационарним фазом такође се разликују. Под истим покретачким снагама, време задржавања сваке компоненте у стационарној фази је различито, тако да се компоненте у смеше пролазе из колоне у одређеном редоследу, постизање одвајања.
Параметар
Откривање остатака пестицида
 |
 |
 |
 |
То често то кажемоКонвенционална хроматографија на колоније заправо одвајање хроматографије на колони, познат и као хроматографија на колони. Прво га је измислио и користио руски научници 1903. године. Срушило је раствор биљних пигмената у калцијум карбонат прах и пронашао различите бендове у боји на калцијум карбонатним прахом од врха до дна. Одвајањем и вађењем различитих бендова у боји добијен је релативно чист хлорофил, лутеин итд.
Након стотину година развоја, ова метода је постала релативно зрела, а стационарна фаза је такође развила од јединственог калцијумовог карбоната у праху до Алумина (која се може поделити у кисело, неутрално, алкално), силика гел итд. Међу њима је најчешће коришћена у главним лабораторијама, углавном подељеним у нормално фазно силика гел и реверсе фазно силика гел.
Стационарна фаза (силика гел) углавном треба пречистити и активирати, а величина честица треба да буде уједначена. Теоретски, мања величина честица и већа површина површине по јединици масе, што је већа адсорпциона капацитет и бољи ефекат раздвајања.
Међутим, у практичној употреби, када су честице фиксне фазе су премале, често постоје две ситуације: Једна је да су лакша у тежини и лако се лебде у ваздуху (не може да деградира на силика гелу, и ситније је то токсичније Друго, мале честице такође могу довести до малих празнина између честица, што резултира спорим растварачем протоком и потрошњом времена; Као пример узимајући силикон, највећа комерцијално кориштена величина силикона тренутно је 200-300 мрежица.
У погледу метода проласка колона, поред аутоматске опреме за анализу, као што су припрема циркулације напред, ефикасна припрема фазе течности и машине за пролазак течности и пролазак ручних стуба углавном је подељено у три врсте: пролазак на колони атмосферског притиска, пролазак на колони притиска пролазећи пролазак на ступање и притисак на колони.
Међу њима, депресија кроз ступац резултира лошем ефикасношћу адсорпције због брзог протока елуента, што доводи до губитка већине бројева ладица и лоше ефикасности раздвајања. Погодан је за раздвајање узорака са релативно отвореним ТЛЦ плочама, посебно за узорке са само једном великом поларном нечистоћом у производу; Већина свог времена проводи се на претходно поступање једињења, уклањајући неке нечистоће пре пажљивог пречишћавања. Треба напоменути да испаравање растварача узроковано негативним притиском током употребе може довести до кондензације великог броја капљица воде на спољној површини колоне. Једињења осетљива на воду не смеју се лако покушати.
Пролазак ступа на атмосферском притиску је најефикаснија метода раздвајања међу три, али зато што се растварач често помера преспоро, чак и најбољи ефекат раздвајања може утицати на ефикасност. Стога се притисак обично примењује у овом тренутку, што се назива пролазном ступом под притиском; Али притисак не сме бити превисок. Генерално, двострука ланац се користи за ручни рад, а рибљи пумпа се користи за аутоматско деловање. Обоје се могу модификовати као што је приказано на слици.
Конвенционални процес преласка колоне:
Рад за припрему треба добро да се обави:
Када одаберете колону, посматрајте да ли постоји плоча за брушење. За ступце без брусилице, не заборавите да попуните дно са неким памуком. Памук не би требао бити превише густ или превише танки, све док може да блокира силикон да се угаси. (Блоггер је директно демонтирао вешалицу за одећу и користио га је да убаци памук у утичницу на утикачу)
Припремите минимални поларитет елуент, УВ лампу (препоручује се лабораторијско особље, ручно, спреман да фотографишете у било ком тренутку), опрему за притисак и тестирање цеви по потреби!
Изаберите одговарајући ступац, додајте силиконски гел, намочите силиконски гел и спљоштити га
ИзборКонвенционална хроматографија на колоније веома важно, а њихова величина треба израчунати на основу количине производа који се углавном може поделити на:
Неколико милиграма колоне (коначни избор за укупну синтезу);
Колона неколико десетина милиграма (подлоге методолошког проширења);
500 милиграма до 1 грама колоне (користећи методологију као сировина);
Стубови око 5 г и веће скале.
Најчешћи омјер пречника колоне до висине у лабораторији је углавном између 1: 2,5 и 1:15. Количина силика гела која се користи као стационарна фаза током учитавања узорка је око 20 до 40 пута од узорак. Стандард за избор ступаца треба да се заснива на ситуацији пењања у ТЛЦ плочи вашег узорка. Ако постоји много нечистоћа у непосредној близини, покушајте да изаберете већу колону што је више могуће, тако да се ваш узорак може прекрити малим танким слојем (препоручена дебљина испод 5 мм). Ако су нечистоће далеко, ова дебљина се природно може повећати, али не препоручује се да дебљина вашег узорка прелази 2цм, осим ако се производ једноставно опристе.
Многи људи погријеше да мисле да додавање више силикона, чак и ако је на мој узорак гушћи, може ли се добро раздвојити? Овај одговор је негативан!
Разлог је тај што ови људи никада нису мислили да узорци испод и горе нису трчали на истој линији, па су могли да добију само неке чисте, од којих је већина прекрижена, а да не спомињемо нечистоће и растварачима и растварачима.
То је такође зашто узорак захтева прорјеђивање!
Након одабира колоне, додавање силикона може се извршити кроз лијевак за храњење. Истовремено, будите сигурни да носите маску и послујете у хаубици за димљење. Разлог за то неће разрадити Блоггер (силикоза).
Што се тиче инфилтрације силика гела, препоручени поступак је: прво поставите колони силика гела са силика гелом, спљоштите површину силика гела руком, повежите дно силика гел колоне у пумпу за воду, а затим сили на барем поларне елуента. Када се елуент ускоро исцури, затворите вентил за искључивање да бисте спречили да се растварач испумпа у пумпу за воду.
Затим, под притиском, силиконски гел се може равномерно натопљен испирањем седам или осам количина колоне са најмању количину агенса за развој.
Узорак изнад
Узорковање је подељено на влажно узорковање и сухо узорковање.
(1) влажно узорковање.
Препоручена метода је употреба пипете са гуменим типом за усисавање узорак, у близини је горњег дела силиконског гела, полако и равномерно испрати узорак све док не прекрива слој, а затим престани да додаје узорак и нанеси притисак да унесете масну масну масну слој; Уроните масну супстанцу у силиконски слој и поновите овај процес више пута док се сви узорци не напуне!
Неки нови студенти могу бити знатижељни зашто се ова операција врши уместо да прекрива влажно процесно уље попут супстанце одједном?
У ствари, ова операција може смањити ефикасну висину слоја узорка. У овом тренутку, хроматографија на колони је већ почела, а наредни узорци су попут растварача који гурају претходне узорке адсорб и ДеСорб у силика гелу.
(2) Што се тиче сувог узорковања.
Ако није апсолутно неопходно, не препоручује се. Чврсти узорци више се препоручују да се претуче или кристалише. "Препоручује се бескрупулозне методе, етил ацетат вс. Вода, ултразвучна осцилација кристализације високог кључаног уља" и "Дељење лабораторијске методе рекристализације".
Сушење узорковање углавном доноси два проблема; С једне стране, током поступка мешања узорка, могућност реакције између узорка и силика гела повећава због потребе да се постави температура за ротациони испаравање; С друге стране, суво учитавање значи да ће адсорбенти бити уведени у слој узорка, повећавајући висину слоја узорка или величине колоне, која захтева више времена и више растварача.
Ако нема другог избора, једноставно сипајте адсорбовани прах у колону за учитавање, са неким захтевима сличним влажним методама.
Додајте безводни натријум сулфат или кварцни песак
Да би се избегло утицај назора у узорку током додавања елуента, узрокујући неравнину, деформацију и утицај на ефикасност одвајања, слој безводног натријум сулфата или кварцног песка углавном је постављен на врх узорка.
Наши инжењери лично радије постављају безводни натријум сулфат јер такође има функцију сушења и пријатељски је за раствараче као што је дихлорометан, који су склони испализацији, апсорпцији топлоте и кондензацији.
Елуција градијента, узорковање и колекција
Након утовара, прво исперите колону са малим поларним растварачем (растварач који неће дозволити да прође кроз) за 2-3 колоне колумне (запремина једне колоне је дефинисана као количина мобилне фазе која тече и искључује уједначеност, а затим је одабрала уједначеност.
Како бирати елуента који пролази кроз колону?
Однос елуента је омјер када ваш производ достигне РФ вредност абоут-а 0. 2 на ТЛЦ плочи
Ово је искуство прања колона које сам прочитао много књига и делио, а стварни процес је такође врло сличан. Лично, више волим да умањим градијент два пута.
На пример, ако је растварач за пењање на ТЛЦ ПЕ / ЕА =2: 1, ће вероватније да ће Блоггер започети градијентски елуцију из ПЕ / ЕА =4: 1 и завршити на ПЕ / ЕА =2: 1, углавном резултирајући бољим резултатима.
Постоје и технике прикупљања елуента. Прво можете да изаберете већу тестну цев да бисте га примили, а када се ТЛЦ приближава циљној тачки, пређите на мању тестну цев. То може умањити могућност да се прими више и избегне нечистоће.
Ако наиђете на ситуације у којима су смирености и бодови производа, посебно оне са слабом флуоресценцијом, сећате се да не примењују притисак. Уместо тога, одлучите да прођете колону у нормалном притиску и промените цев сваки пут када су половина или мање цеви повезане, што такође може повећати вероватноћу прочишћавања.
Не заборавите да не решите стуб благовремено!
Многи људи имају навику да претпоставља да је колона прошао и осушен када у једној или две цеви нема производа након ТЛЦ-а након ТЛЦ-а у каснијој фази.
Схватио сам само да је принос пренизак када сам га израчунао, или када сам отишао да направим спектар, открио сам да је спектар нетачан и пропустио погрешну тачку. Дубоко сам га жалио.
Дакле, препоручује се да не журите да обрађујете колону након завршетка жељене тачке. Уместо тога, извршите нуклеарну магнетну резонанцу да одговара приносу пре обраде.
Ако сте заузети или у журби да пречистите друга једињења са овимКонвенционална хроматографија на колони, Препоручује се испирање са високом поларитетом бенигном мешаним растварачем и оставите овај део елуента одвојено за резултате идентификације.
Popularne oznake: Конвенционална хроматографија на колони, Кина Конвенционална произвођачи хроматографије на колони, добављачи, фабрика
Pošalji upit
