Кроматографија на класичној колони
2. хроматографски ступац (тип ротације)
3. Хроматографска колона (приручник)
*** Ценовник за целокупно горе, питајте нас да бисмо добили
Opis
Tehničke karakteristike
Кроматографија на класичној колоније темељна техника раздвајања која се широко користи у хемији и биохемији за пречишћавање и изолацију компоненти из смеша . делује на принципу диференцијалне партиције супстанци између стационарне фазе упаковане у колони и мобилне фазе која тече кроз њега .
Стационарна фаза, обично чврст адсорбент попут силика гела или глинице, чврсто је упакована у стаклену или пластичну смешу . уплетену смешу, а затим додатком мобилне фазе-растварача или мешавине растварача . јер је мобилна фаза различито на основу својих хемијских својстава, праћено додатним фазама, праћено додавањем мобилне фазе. као што је поларитет, величина и афинитет за адсорбент .
Једињења са јачим интеракцијама са стационарним фазом се полако крећу спорије кроз колону, док оне са слабијим интеракцијама путују брже . ову диференцијалну миграцију резултирају одвајањем смеше у различитим бендовима или фракцијама, које се могу прикупљати појединачно .
Вредна је за његову једноставност, свестраност и економичност и економичност . погодна је за анализу и квантификоване компоненте и препаратне раздвојене одвајање, како би се добиле веће количине пречишћених супстанци . упркос напредној техникема попут ХПЛЦ-а, остаје спајала у многим лабораторијама због своје доступности и ефикасности у многим лабораторијама.
Параметри
Основни принципи
|
|
Кроматографија на класичној колони, also known as liquid-solid chromatography, is a technique for separating solutes based on the difference in distribution between a stationary phase (usually a solid adsorbent) and a mobile phase (solvent). The basic principle can be summarized as follows: with the help of the fixed phase, the solute of the solution is adsorbed, and then the components of the mixture are further separated into discrete components by using the different distribution коефицијенти између фиксне фазе и мобилне фазе . У колони хроматографија, стационарна фаза се обично састоји од порозне честице (као што је силика гел, Алумина, Активирани угљеник, итд. .), који има велику специфичну површину и адсорпциони центар и могу да формирају силе и друге интеракције, резултирајући адсорпцијом . мобилном фазом, што је постали молекуле са грађевинским молекулама .. фаза и њен избор треба да се утврди у складу са поларитетом раствора и адсорпционе карактеристике адсорбента . У процесу раздвајања, раствор смеша је уведено у колону која садржи стационарну фазу . са протоком мобилне фазе, компоненте се крећу низ колоне на различите брзине услед различитих адропсијских капацитета стационарне фазе, тако да се покрене споро . како се полако крећу, тако да се покрене споро .. Фаза, а брзина покретања је бржа . на овај начин, свака компонента формира низ боја у боји на колони за постизање одвајања . |
Аминокиселина анализа
Аминокиселина анализа се обично врши помоћу течне хроматографије, чија јеКроматографија на класичној колониis a commonly used technique. In this method, ion exchange resin is used as stationary phase to separate amino acids according to the difference of electric charge. Amino acids may need to be converted to a more detectable form by derivatization before the sample enters the column. Derivatization can improve the separation effect and detection sensitivity of amino acids on chromatographic column.
- Припрема узорака: Узорак протеина је хидролизован у аминокиселине . то се може постићи киселином хидролизом или ензимском хидролизом . хидролизованим узором треба да прође правилно пре-лечење, попут уклањања протеинских остатака .
- ДЕРИВАТИЗАЦИЈА: Да би се побољшала осетљивост на аминокиселински анализа за откривање и одвајање, дериватизација аминокиселина је често потребна . Постоје две врсте деривација аминокиселина: деривати пред-стубова и деривати на стубовима . који су обично коришћени деривати пред-колоне (ОПА), метил хлорофлуорен (Фмоц-ЦИ), фенил изотиоцијанат (Питц), данзиб хлорид (ДАНСИЛ-ЦИ), 2, 4- динитрофлуоробензен (ФДНБ) итд. .
- Избор колоне: Изаберите колону Погодни за анализу аминокиселина, као што је колона за размену ИОН-а, Ц18 колона, Ц8 колона итд. .
- Подешавање хроматографског стања: Подесите одговарајуће хроматографске услове, укључујући мобилну фазу, проток, градијентни програм итд. . Уобичајене мобилне фазе укључују пуфере који садрже ионске парове, попут форматних пуфера .
- Анализа узорка: Узорак након хидролизе и дериватизације убризгано је у хроматограф за анализу . упоређивањем вршног подручја и концентрације сваке аминокиселине у узорку на стандардној кривини, садржај аминокиселине у узорку може се квантитативно анализирати .
- Обрада података: према вршним подручју и подацима концентрације добијене из анализе израчунава се садржај сваке аминокиселине у узорку, а подаци се обрађују и пријављује се резултат и резултат се пријављује .
Много је примера примене у анализи аминокиселинских киселина, а у наставку је неколико специфичних предмета:
- Откривање основних аминокиселина: Употреба може открити садржај основних аминокиселина, као што је изолеуцин, леуцин, лизин итд. . ове аминокиселине играју виталну улогу у људском телу и важни су за одржавање виталне активности и здравља .
- Одређивање аминокиселина у кинеској медицини: У анализи кинеске медицине, такође се широко користи да би се утврдила садржај аминокиселина у кинеској медицини . на пример, приликом одређивања садржаја пареонифлора у Вуји баифенг-у, колона са октадецилсиланским силика гелом јер се може користити и за анализу и одређивање друге амино киселине .
- Determination of amino acids in food: Amino acid content in food is also one of the important application areas. For example, in the determination of nucleotides in infant food and dairy products, five nucleotides in milk powder can be isolated and determined using a C18-T reversed-phase column or a column with equivalent performance. At the same time, the method can also be used to determine the content of amino acids in Остала храна, која пружа важну основу за процену контроле и исхране хране .
У анализи аминокиселина потребно је одабрати одговарајуће реагенсе за дериватизацију и услови дериватизације за побољшање осетљивости и тачности детекције .
Избор колоне и постављање хроматографских услова имају важан утицај на ефекат раздвајања и потребно је оптимизовати у складу са специфичним узорком и аналитичким потребама .
У процесу анализе, потребно је обратити пажњу на услове припреме и складиштења узорака како би се избегли утицај контаминације и разградње узорка на резултате анализе .
Шта је дериватирано лечење
Дериватизација је важна техника преноса узоракаКроматографија на класичној колони, који има за циљ да побољша перформансе откривања и ефекат раздвајања аналитика . следеће је детаљно објашњење процеса дериватизације:
|
► Сврха деривативног третмана 1) Побољшане перформансе откривања: увођењем функционалних група које је лако откривати, аналитичар генерише јачи сигнал на детектору, побољшавајући осетљивост и тачност откривања . |
|
|
|
► Врста деривативног третмана 1) Деривација пред колони: |
|
Подешавање пост-колоне има предности добре обновљивости и мање утицаја на факторе, али захтева додатне инструменте и опрему . 1) Побољшана осетљивост на откривање: На пример, у аминокиселинским анализама, увођењем функционалних група (као што су флуорофоре) кроз дериватизацију пре ступања може повећати снагу сигнала аминокиселина аминокиселина на детектору, на тај начин побољшање осетљивости детекције . |
|
Кроматографија на класичној колони, основна техника у науци за раздвајање, и даље се развија са унапређењем материјала и методологије, обезбеђујући њену важност и у истраживачкој и индустријске апликације .
Једно обећавајуће смер је интеграција нових стационарних фаза . иновације у материјалној науци довела је до развоја материјала за паковање високих перформанси са појачаном селективношћу, стабилношћу и ефикасношћу.
Поред тога, све се више комбинује са напредним техникама откривања, попут масене спектрометријом, да би се побољшала осетљивост и тачност . Ова хибридизација омогућава свеобухватнију анализу сложених смеша, која проширује применљивост технике у пољима попут метаболомија и протеомика .
Закључно, будућност лежи у свом прилагођавању новим материјалима, минијатуризацији и интеграцији са врхунским методама детекције, обезбеђујући њену сталну услугу у савременим научним и индустријским пејзажи .
Popularne oznake: Кроматографија у класичној колони, Кина Кроманографија Цхласицал Цхоматографије, добављачи, фабрика
Pošalji upit
